國家自然科學基金重大重點項目
近年來，我校作為項目牽頭單位承擔了國家自然科學基金重大重點項目7項，立項總經費達2277萬元，這些項目為解決中醫藥學科關鍵基礎科研問題提供了重要的理論指導和技術支持。項目在執行過程中，科技處積極協助處理項目管理工作，通過科研人員的通力合作，6個結題項目全部通過基金委組織的的專家驗收，并在基礎研究方面取得了顯著的科研成果，為后續的項目驗收奠定了良好的基礎。
項目名稱：穴位敏化的客觀顯像研究
項目負責人：李志剛
成果介紹：
項目以穴位敏化客觀成像研究為中心，運用光聲成像進行膝骨關節炎、心肌梗死模型動物的穴位敏化的微血管形態成像研究；運用激光散斑成像技術進行穴位敏化的微循環灌注量研究，完成了穴位敏化的組織微循環層次的客觀顯像研究；本項目運用軟X射線納米CT完成穴位敏化的細胞結構3D成像；運用傳統甲苯胺藍染色、透射電鏡、免疫熒光等技術進行穴位敏化細胞水平的2D成像，完成了穴位敏化的細胞層次客觀顯像研究；本項目運用金納米微粒構建可活體標記敏化重要分子5-HT的分子探針，并在膝骨關節炎、心肌梗死模型2種動物載體上應用活體熒光和磁共振兩個成像平臺對不同疾病小鼠進行連續動態的成像觀察，實現了穴位敏化的分子層次的客觀顯像研究。
項目在執行期內完成全部研究既定目標，并取得以下成果：
（1）首次搭建了對小鼠活體穴區檢測的光聲成像的平臺與方案實現了對小鼠膝關節、肘部穴區及背部穴區的活體動態成像，并編寫了用于分析穴區光聲成像數據的基于 MATLAB 軟件的計算代碼，完成了本項目光聲成像數據分析。
（2）首次搭建了對小鼠穴區組織透析液中肥大細胞成像的納米 CT 成像平臺，并制定了本項目組的分割方案，即基于亞細胞結構、前期電鏡研究的先驗知識等，對納米 CT 斷層掃描的單層圖像進行手動分割，隨即進行 LAC 運算，結合形態綜合判斷與確認亞細胞結構。最終基于 AMIRA 軟件對所分割亞細胞結構的內徑、體積和密度進行量化分析。
（3）利用納米金顆粒成功偶聯 IR780、PEG 化 Fe3O4 及 Anti-5-HT antibody，合成了能夠特異性活體標記 5-HT，并且在光學、磁共振兩種平臺成像的生物分子探針。
本研究獲取了穴位敏化局部由生理“沉寂”狀態到病理“敏化”狀態以及疾病不同程度的客觀顯像與動態數據，通過量化結果揭示穴位敏化的特征性改變，豐富與完善了腧穴理論。同時，本項目開發了穴位敏化的分子顯像探針，為客觀呈現穴位敏化過程提供了先進、可靠的工具。 本項目已完成組建一支長期合作、多學科交叉的高層次創新研究隊伍。已在國際會議或國內外有影響的期刊發表論文 20余篇，另有 3 篇在審稿中，4 篇在撰寫中。 項目組成員在本項目基礎上，申請并成功獲得 8 項科研項目資助，累計資助經費396.8萬元，包含 1 項國家重點研發計劃，一項國家自然科學基金面上項目，4項國家自然科學基金青年基金項目，以及2項中央高校基本科研項目。依托本項目，項目組成員先后共獲各類獎項14項；依托本項目，共培養博士后1名，博士6名，碩士12名，項目成員中完成職稱晉升3人。
1)運用光聲成像進行膝骨關節炎模型及心肌梗死模型動物的穴位敏化的微血管形態成像研究以及運用激光散斑成像進行穴位敏化的微循環灌注研究，完成了穴位敏化的組織微循環層次的客觀顯像研究。
2)運用軟 X 射線納米 CT 完成穴位敏化的細胞結構 3D 成像，運用傳統甲苯胺藍染色、透射電鏡、免疫熒光等技術進行穴位敏化細胞水平的 2D 成像，完成了穴位敏化的細胞層次客觀顯像研究。 3)運用金納米微粒構建可活體標記敏化重要分子 5-HT 的分子探針，并在膝骨關節炎、心肌梗死模型 2 種動物載體上應用活體熒光和磁共振兩個成像平臺對不同疾病小鼠進行連續動態的成像觀察，實現了穴位敏化的分子層次的客觀顯像研究。經各組非穴區提取的微透析液刺激后的肥大細胞，胞內充滿較多高密度的顆粒，未見低密度顆粒及空泡，在第 14d、21d 細胞形態結構無明顯變化，參見圖48。經各組陽陵泉穴穴區提取的微透析液刺激后的肥大細胞，模型組在第 14d 可見有顆粒脫出，低密度顆粒出現，顆粒膜與細胞膜相融合；在第21d，顆粒密度進一步降低出現空泡樣結構，與透射電鏡所示在體結果相一致。
